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蛋白電泳(PAGE)

更新時間:2010-02-27  |  點擊率:3830

蛋白電泳(PAGE)

聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯劑N,N-甲叉雙丙烯酰胺在加速劑N,N,N,N—四甲基乙二胺(簡稱TEMED)和催化劑過硫
酸銨(簡稱AP)或核黃素(即vitamin B2)的作用下聚合交聯成三維網狀結構的凝膠,以此凝膠為支持物的電泳稱為聚丙烯酰胺凝膠電泳
(polyacrylamide gel electrophoresis,簡稱PAGE)
S DS-PAGE是在要電泳的樣品中加入含有SDS和β-巰基乙醇(或者DTT)的樣品處理液,SDS可以斷開分子內和分子間的氫鍵,破壞
蛋白質分子的二級和三級結構,β-巰基乙醇可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質的四級結構。SDS還與蛋白質結合使蛋白
質-SDS復合物上帶有大量的負電荷,這時各種蛋白質分子本身的電荷*被SDS掩蓋。這樣電泳時,就消除了各種蛋白質本身電荷及結
構上的差異,電泳速度只是與蛋白質分子量有關。用本法測定蛋白質的分子量只需根據待測蛋白質在已知分子量的標準蛋白質圖中的位
置,就能得知分子量.




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